1、实验结果的统计处理需根据具体实验要求来确定。你可以选择使用吸光度(OD)值、细胞存活率或细胞抑制率等作为统计指标。 在查阅相关文献时,你会注意到这些指标在文献中均有应用。你可以参考这些文献来选择最适合你实验的数据表达方式。 绘制实验曲线并不复杂,可以使用EXCEL或SPSS等软件工具来完成。
2、要计算细胞抑制率,用1减去所得到的增殖率即可。
3、在配制MTT时,通常使用PBS(磷酸盐缓冲溶液)溶解,也有部分人选择生理盐水。以下是PBS的配方:NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4 44gKH2PO4 0.24g调整pH值至4最终定容至1L扩展资料MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。
4、第三天、第四天:解冻MTT,检测细胞生长状态,加入MTT溶液,培养4小时后,加入增溶溶液,振荡溶解,测量吸光度,处理分析结果。实验过程中需注意以下几点: 接种时细胞悬液需混匀,避免沉淀。 减少误差,培养板周围孔只加培养基。 加样本前,先吸出培养基,避免细胞死亡。
1、MTT法实验步骤如下:首先,收集对数期细胞,调整浓度至1000-10000个细胞/孔,用100ul细胞悬液铺板于96孔平底板上,边缘孔用无菌PBS填充。细胞在5% CO2和37℃的环境下孵育,直至形成单层细胞。
2、以下是以贴壁细胞为例的实验步骤: 细胞铺板:通常使用96孔板,收集对数期细胞,铺板密度为1000-10000/孔,每孔加液量100μl(边缘孔用无菌PBS填充)。
3、实验操作步骤包括:接种细胞,培养细胞,呈色,比色。接种时使用含10%胎小牛血清的培养液配成单个细胞悬液,接种于96孔板。培养条件同一般条件,培养3-5天。细胞培养后,每孔加MTT溶液,继续孵育4小时,吸弃孔内上清液,加DMSO溶解结晶。比色时在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值。
MTT分析法是一种基于活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)的细胞增殖检测方法。MTT是一种黄色化合物,可作为氢离子受体,在活细胞线粒体中,通过琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下开裂tetrazolium环,生成蓝色的formazan结晶。
细胞增殖检测方法:MTT法 MTT法主要以3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝作为基础,该物质在活细胞线粒体中的呼吸链作用下,tetrazolium环开裂生成蓝色的formazan结晶,其生成量与活细胞数目成正比。
MTT法,又称MTT比色法,是一种广泛应用于检测细胞存活和生长的常用方法。检测原理是,活细胞中的线粒体琥珀酸脱氢酶能够将外源性MTT还原成不溶于水的蓝紫色结晶甲臜,并沉积在细胞中。而死细胞则不具备这一功能。
在选择细胞增殖检测方法时,MTT法(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物)和CCK8(细胞计数检测试剂盒)都有其特点。MTT法通过活细胞的线粒体还原外源MTT形成结晶,然后测定其溶解后吸收值,反映细胞存活。但其操作复杂,可能影响实验结果准确性,并且存在致癌风险。
在评估细胞增殖时,MTT法和CCK8法各有所长。MTT法通过检测活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶催化MTT还原形成蓝紫色结晶甲臜,反应过程需溶解结晶,操作相对复杂且可能影响实验精度;而CCK8法利用水溶性四唑酮盐,减少溶解步骤,操作简便,但成本较高。